Ksantoproteinovaya reakcia na proteín: znaky a vzorec rovnice

Na stanovenie kvalitatívne zloženie mnohých potravinách používaných ksantoproteinovaya reakciu na bielkoviny. Prítomnosť aromatických aminokyselín v zmesi sa bude meniť v pozitívnom farby skúšobnej vzorky.

Čo je proteín

To je tiež nazývané proteín, ktorý je stavebným materiálom pre živé telo. Proteíny udržanie svalovej hmoty, obnovenie zranených a mŕtve tkanivá štruktúry rôznych orgánov, či už ide o vlasy, kožu a väzy. S ich účasti, produkuje červené krvinky, sa riadi bežnou prevádzkou mnohých hormónov a buniek imunitného systému.

Jedná sa o komplexné molekula, ktorá je polypeptid, ktorý má hmotnosť väčšiu ako 6 ~ 10 ³ daltonov. Štruktúra proteínu tvoriť aminokyselinových zvyškov v veľkého počtu spojené peptidovou väzbou.

štruktúra proteínov

Charakteristickým rysom týchto látok v porovnaní s peptidmi s nízkou molekulárnou hmotnosťou je, že vyvinuli trojrozmerné priestorové štruktúry, podporované účinky s rôznym stupňom príťažlivosti. Proteíny majú štyri-štruktúru. Pre každý z nich má svoje vlastné charakteristiky.

Ako základ primárnej organizácie molekúl Odvodené aminokyselinová sekvencie, štruktúru, ktorá rozpoznáva ksantoproteinovaya reakciu na bielkoviny. Táto štruktúra je periodicky sa opakujúca peptidová väzba -HN-CH-CO-, selektívne časť radikály sú vedľajšie reťazce na aminokyseliny. Definujú ďalšie vlastnosti látky ako celku.

Štruktúra Primárne Proteín je považovaný za dostatočne silné, to je vzhľadom k prítomnosti silných kovalentných interakcií v peptidových väzieb. Tvorba ďalších úrovní dochádza v závislosti na vlastnostiach uvedených v počiatočnej fáze.

Tvorba sekundárne štruktúry je možné vďaka krútenie aminokyselinové sekvencie v špirále, v ktorých sú vodíkové väzby vytvorené medzi závitmi.

Terciárny stupeň organizácie molekúl vytvorený nanesením jedného z špirály o ostatných fragmentov s výskytom všetkých možných spojení medzi nimi, s vodíkom, disulfid, kovalentné alebo iónové zlúčeniny. Výsledkom je združenie vo forme guličiek.

Priestorové usporiadanie terciárnych štruktúr s tvorbou chemických väzieb medzi nimi vedie k vytvoreniu konečnej podobe molekuly alebo kvartérne úrovni.

aminokyseliny

Spôsobujú chemické vlastnosti proteínov. Existuje asi 20 hlavných aminokyselín, ktoré tvoria polypeptidy, v inom poradí. To tiež sa označuje vzácne aminokarboxylové kyseliny v tvare hydroxyprolínu a hydroxylysin odvodený základný peptid.

Na znamenie proteínu reakcie uznanie ksantoproteinovaya, prítomnosť určitých aminokyselín poskytuje farebné zmeny činidiel, čo naznačuje prítomnosť špecifických štruktúr v ich zložení.

Ako sa ukázalo, sú karboxylové kyseliny, ktoré sa objavili, substitúciu atómu vodíka na aminoskupinu.

Príklad štruktúra molekuly môžu slúžiť štrukturálny vzorec glycín (HNH- HCH- COOH) ako najjednoduchšie aminokyseliny.

V tomto prípade je jeden z atómov vodíka CH ₂ -, môže byť nahradený uhlíkom už radikálnu ktorá obsahuje benzénovej kruh, amino, sulfo, karboxyskupinu.

Čo ksantoproteinovaya reakcie

Pre kvalitatívne analýzy proteínov za použitia rôznych techník. Patrí medzi ne reakcie:

• Biuretova s výskytom fialovej farby;
• ninhydrínom pomocou pre vytvorenie modrofialový roztok;
• formaldehyd sa zriadením červenej farby;
• Nogiér k vyzrážaniu šedo-čiernej farby.

Pri vykonávaní každej metóda sa ukázala prítomnosť bielkovín a prítomnosť určitých funkčných skupín v molekule.

Tam ksantoproteinovaya reakcia na proteín. To je tiež nazývané rozdelenie Mulder. To sa vzťahuje na farebné reakcie pre proteíny, v ktorých sú aromatické a heterocyklické aminokyselín.

Funkcia takéhoto postupu vzorky je nitrácia kyselinou dusičnou zvyšky cyklických aminokyselín najmä pristúpení nitroskupiny na benzénové kruh.

Výsledkom tohto procesu je vznik nitrozlúčeniny, ktorá sa vyzráža. Jedná sa o základné funkcie ksantoproteinovaya reakcie.

To, čo určuje aminokyselinu

Nie všetky aminokarboxylové kyseliny môže byť detekovaný s použitím takého vzorky. Hlavným rysom reakcie detekcie ksantoproteinovaya proteínov - prítomnosť benzénovými kruhom alebo heterocyklickým kruhom v molekule aminokyselín.

Vzhľadom k tomu, že proteín je izolovaný od aminokarboxylových kyselín dvoch aromatických, v ktorých je fenylovej skupina (fenylalanín), a hydroxyfenyl radikál (v tyrozínu).

S ksantoproteinovaya reakcie sa stanoví heterocyklické aminoskupinu tryptofán kyseliny, indol, ktorý má aromatické jadro. Prítomnosť vyššie uvedených zlúčenín v proteínu dáva charakteristickú zmenu farby skúšobného prostredia.

K čomu činidlá

Pre realizáciu reakcie ksantoproteinovaya potrebné pripraviť 1% roztok vo vaječnej bielkoviny, alebo rastlinného pôvodu.

Zvyčajne sa používa vajcia, ktorá je rozdelená na ďalší separáciu proteínu z žĺtka. Pre 1% roztoku proteínu sa zriedi v množstve desaťnásobného čistenej vody. Po rozpustení výsledné proteínové kvapaliny by mal byť filtrovaný cez niekoľko vrstiev tenká. Toto riešenie by mali byť skladované na chladnom mieste.

Je možné vykonávať reakciu s rastlinné bielkoviny. Na prípravu roztoku sa používa pšeničnú múku v množstve 0,04 kg. 0,16 l čistenej vody. Zložky boli zmiešané v banke, ktorá je viazaná na 24 hodín v chlade pri teplote asi + 1 ° C Na konci dňa sa roztok mieša, načo nasleduje filtrácia jeho prvá vatou a potom - papierový skladaný filter. Výsledná kvapalina sa udržuje v chlade. Toto riešenie je prítomný prevažne vo frakcii albumínu.

Pri vykonávaní reakcie ksantoproteinovaya ako hlavný činidlá použité koncentrovanej kyseliny dusičnej. Ďalšie činidla je 10% roztok hydroxidu sodného alebo amoniaku, želatínového roztoku a nekoncentrované fenolu.

metodika

V čistej skúmavky sa vykonáva 1% roztok proteínu tý vajcia alebo múky v množstve 2 ml. K tomu sa pridá asi 9 kvapiek koncentrovanej kyseliny dusičnej do vločkovanie zastavil. Výsledná zmes sa zahrieva, čo vedie k žltej zrazeniny postupne mizne a jeho farba prechádza do roztoku.

Keď kvapalina ochladzuje v trubici pozdĺž steny pridá asi 9 kvapiek hydroxidu sodného, koncentruje sa, čo je prebytok pre proces. Reakčná zmes sa stane alkalické. Obsah stane oranžovú farbu v skúmavke.

vlastnosti

Vzhľadom k tomu, ksantoproteinovaya nazýva kvalitatívne reakciu na kyselinu dusičnú pôsobením proteínov, vzorka sa vykonáva za súčasťou digestore. Pri práci s koncentrovanými žieravin dodržiavať všetky bezpečnostné opatrenia.

Uvoľnenie obsahu z trubice môže nastať počas procesu ohrievania, ktoré sa musia brať do úvahy pri upevnení v držiaku a výberu sklon.

Voľba koncentrovanej kyseliny dusičnej a hydroxidu sodného by sa len s použitím sklenenej pipety a hrušky gumovou zakázanú pipety ústami.

Relatívna reakcia s fenolom

Pre upresnenie, proces a potvrdenie prítomnosti fenylových skupín sa vykonáva podobným vzorke hydroxybenzen.

Rúrka výrobu 2 ml zriedeného fenolu, potom postupne pozdĺž steny, boli pridané 2 ml koncentrovanej kyseliny dusičnej. Tento roztok sa podrobí ohrevu, čím sa stáva žlté. Táto reakcia je kvalita prítomnosti benzénové kruh.

Proces hydroxybenzen Nitrum kyselinou dusičnou následným vytvorením zmesi p-nitrofenolu a o-nitrofenolu v percentách 15 až 35.

Porovnávací test s želatínou

Na preukázanie, že ksantoproteinovaya reakcia na proteín ukazuje, aminokyseliny s aromatickou štruktúrou, iba proteíny, ktoré nemajú fenolovou skupinu.

V čistej skúmavky sa vykonáva 1% roztoku želatíny v množstve 2 ml. K tomu sa pridá asi 9 kvapiek koncentrovanej kyseliny dusičnej. Výsledná zmes sa zahreje. Roztok sa nefarbené žlto, čo dokazuje neprítomnosť aminokyseliny s aromatickou štruktúrou. Niekedy dochádza k miernemu žltnutie životného prostredia v dôsledku prítomnosti proteínových nečistôt.

chemické rovnice

V dvojstupňová reakcia beží ksantoproteinovaya proteíny. Vzorec Prvý spôsob nitrácia fáza popisuje aminokyselinové molekuly kyseliny za použitia koncentrovanej kyseliny dusičnej.

Príkladom je pripojenie nitroskupiny na tyrozínu za vzniku nitrotyrosinu a dinitrotirozina. V prvom prípade na benzénové kruhu je pripojený jeden NO ₂ -radical, a druhá látka má dva atómy vodíka sú nahradené NO _2. Chemický vzorec ksantoproteinovaya tyrozín reakcie reprezentované reakciou s kyselinou dusičnou za vzniku nitrotyrosinu molekuly.

Nitrácia proces je sprevádzaný prechodu bezfarebné farbenie v žltom tóne. Pri vykonávaní tejto reakcie sa proteíny, obsahujúce aminokyselinové zvyšky fenylalanínu alebo tryptofánu, a farba roztoku zmení.

Druhým krokom je reakčný produkt nitrácia tyrosinových molekúl, najmä nitrotyrosin, s amóniom alebo hydroxidu sodného. Výsledkom je sodná alebo amóniová soľ, v ktorom žlto-oranžová farba. Takáto reakcia je spojená s možnosťou molekúl nitrotyrosinu pohybovať v chinoidní forme. Následne soľ, ktorú tvorí kyselina nich Nitronic, ktorý má CHINON systém konjugovaných dvojitých väzieb.

Takto končia ksantoproteinovaya reakciu na proteíny. Rovnica uvedené vyššie druhom kroku.

výsledok

Pri analýze tekutín obsiahnutých v troch trubkách, je referenčná roztok sa zriedi s fenolom. Látky s benzénovými kruhom poskytnúť kvalitatívne reakcii s kyselinou dusičnou. V dôsledku toho sa zmení farbu roztoku.

Ako je známe, želatína obsahuje hydrolyzovanú formu kolagénu. Proteín neobsahuje aromatickú štruktúru aminokyselín. Žiadna zmena vo farbe médiá reakciou s kyselinou.

V tretej skúmavke je pozitívna reakcia na bielkoviny ksantoproteinovaya. Záver možno vyvodiť nasledujúce: všetky proteíny s aromatickou štruktúrou, či už ide o fenylovej skupinu alebo indolový kruh, vzhľadom na zmenu farby roztoku. To je vzhľadom k tvorbe nitrozlúčenín s žltej farby.

Prevedenie farebnú reakciu dokazuje prítomnosť rôznych chemických štruktúr v aminokyselín a bielkovín. Príklad želatína ukazuje, že jeho zloženie zahŕňa kyselinu aminokarboxylové nie je majúci fenylovej skupinu alebo cyklickú štruktúru.

S ksantoproteinovaya reakciu možno vysvetliť zožltnutie pokožky, keď na neho pôsobí silnou kyselinou dusičnou. Rovnakou farbou bude napenené mlieko počas jej podobnú analýzu.

V klinickej laboratórnej praxi je tento farebný vzorka nie je používaný pre detekciu proteínu v moči. Toto je kvôli žltej farbe samotného moču.

Ksantoproteinovaya reakcia sa stále viac používajú pre kvantifikáciu aminokyselín, ako je tryptofán a tyrozín, ako súčasť rôznych proteínov.