Mikroskopické metódy v mikrobiológiu

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. Mikroskopické výskumné metódy sú spôsoby, ako preskúmať rôzne predmety s využitím špeciálneho vybavenia. To nám umožňuje uvažovať štruktúru látok a organizmov, ktorého veľkosť je za hranicou rozlišovacou schopnosťou ľudského oka. V článku je uvedený stručnú analýzu mikroskopických metód.

Prehľad

используют в своей практике разные специалисты. Moderné metódy mikroskopického vyšetrenia iným odborníkom vo svojej praxi. Medzi nimi sú virologists, cytológie, hematológia, morfológia, a iní. Hlavné metódy mikroskopického vyšetrenia sú známe po dlhú dobu. Prvým z nich je ľahký spôsob pohľadu na objekty. V posledných rokoch sa aktívne zavedené do praxe a ďalšími technológiami. . To znamená, že obľuba získaných s fázovým kontrastom, luminiscenčné, interferencie, polarizácia, infračervené, ultrafialové, stereoskopické metódy výskumu. Všetky z nich sú založené na rôznych vlastností svetla. . Okrem toho, široko používané metódy elektrónovej mikroskopie. Tieto metódy umožňujú objekty zobrazenie, s použitím smerového prúdu nabitých častíc. Je potrebné poznamenať, že tieto štúdie metódy sa používajú nielen v biológii a medicíne. в промышленности. Celkom populárne metóda mikroskopické štúdie kovov a zliatin v priemysle. To umožňuje štúdii pre posúdenie správania zlúčenín pre výrobu technológií, aby sa minimalizovala pravdepodobnosť lomu a zvýšenú pevnosť.

Ľahké spôsoby: Charakteristika

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. Tieto mikroskopické metódy pre štúdium mikroorganizmy a ďalšie zariadenia na základe rôznych rozlíšenie zariadení. Dôležitým faktorom je to smer charakteristík lúčové samotného objektu. Ten, najmä môže byť priehľadný alebo nepriehľadný. V súlade s vlastnosťou objektu, zmena fyzikálnych vlastností svetelného toku - jasu a farby vzhľadom k amplitúde a vlnovej dĺžky, roviny, fáza a smere šírenia vĺn. . Pokiaľ ide o používanie týchto vlastností a vybudovať rôzne mikroskopických metód.

špecifickosť

Študovať spôsoby svetelných objektov, obvykle zafarbený. To umožňuje identifikovať a popísať tieto alebo iné vlastnosti. Je nevyhnutné, aby tkanivo bola stanovená, pretože sfarbenie odhaliť určité štruktúry výlučne v usmrtených buniek. V živých bunkách oddeliť farbivo vo forme vakuol v cytoplazme. Nemá maľuje cez štruktúru. Ale so živými objektmi a môžu byť skúmané pomocou svetelného mikroskopu. Za týmto účelom zásadný spôsob učenia. V takýchto prípadoch je v tmavom poli kondenzátora. To je zakotvený v svetelným mikroskopom.

Študovať nenatreté objekty

To sa vykonáva s fázovým kontrastom mikroskopie. Táto metóda je založená na difrakciu nosníka v súlade s charakteristikami objektu. V priebehu expozície zmeny vo fáze a vlnovej dĺžke. V mikroskopu šošovky je prítomný priesvitná doska. Žiť alebo pevné, ale nie maľované predmety, vzhľadom k jeho transparentnosti, takmer nemení farbu, a amplitúda lúča prechádzajúceho nich, provokovať len posun fázy vlny. Ale v tomto prípade, po prechode objektu, svetelný tok vychyľovaný dosky. V dôsledku toho sa medzi nosníky, chýba prostredníctvom objektu a vstup do svetlom pozadí, nastane rozdiel v dĺžke vlny. Pri určitej hodnote jeho vizuálny efekt nastane - tme objekt bude jasne viditeľný na svetlom pozadí, alebo naopak (v súlade s charakteristikami fázy, doska). Ak chcete získať tento rozdiel by mal byť aspoň štvrtiny vlnovej dĺžky.

metóda Anoptralny

On je druh metódy s fázovým kontrastom. Spôsob Anoptralny zahŕňa použitie šošovky so špeciálnymi doskami, ktoré menia len farbu a jas okolitého svetla. To značne rozširuje možnosti študovať unstained živé objekty. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. Aplikovaná fázový kontrast Spôsob mikroskop výskum v oblasti mikrobiológie, parazitológie v štúdii rastlinných a živočíšnych buniek, prvoky. V spôsobe hematologického sa používa na výpočet a stanovenie diferenciáciu krvných buniek a kostnej drene.

techniky rušenie

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Tieto mikroskopické metódy výskumu všeobecne riešiť rovnaké problémy ako fázovým kontrastom. Avšak, v tomto druhom prípade, odborníci môžu pozorovať iba obrysy objektov. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. Mikroskopické metódy výskumu rušenie nám umožní študovať ich časť, vykonávať kvantitatívne prvky hodnotenia. To je možné v dôsledku rozdelenia svetelného zväzku. Jeden prúd prechádza cez objekt častíc, a druhý - od. V okuláru mikroskopu sa stretávajú a rušiť. Rozdiel vyplývajúci fáza môže byť určovaná podľa hmotnosti rôznych bunkových štruktúrach. Pri sekvenčná meraní s vopred určeným indexom lomu môže byť nastavená hrubé nefixovaných tkanív a živého objektu, obsah bielkovín v ňom koncentrácia pevných látok a vody, a tak ďalej. V súlade s prijatými odborníkmi dát sú schopné nepriamo hodnotiť membránové permeability, enzýmovú aktivitu, bunkový metabolizmus.

polarizácia

To sa vykonáva pomocou Nicol hranolov alebo filmy Polaroid. Sú umiestnené medzi vzorkou a svetelného zdroja. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. Polarizačný metóda mikroskopia výskum v oblasti mikrobiológie nám umožňuje študovať objekty s nehomogénnych vlastností. V orientovaných plechov štruktúr rýchlosť šírenia svetla je nezávislá na vybrané roviny. V rýchlosti anizotropné systémy sa líšia v závislosti na svetlo orientované pozdĺž priečnej alebo pozdĺžnej osi objektu. V prípade, že hodnota indexu lomu pozdĺž konštrukcie bude väčší ako v priečnom, vytvára pozitívny dvojlom. To je typické pre mnoho biologických objektov, ktoré sa nachádzajú prísne molekulárnej orientácii. Všetci sú anizotropné. V tejto kategórii, najmä myofibril, neurofibrils, rias v riasinkami epitelu, kolagénových vlákien, a ďalšie.

polarizácia hodnota

Porovnanie povahe žiarenia a indexu lomu anizotropia objektu umožňuje odhadnúť molekulárnu štruktúru organizácie. Metóda polarizácie slúži ako jeden z histologických metód analýzy použitých v cytológiu a tak ďalej. Nielen natreté predmety môžu byť študované vo svetle. Metóda polarizácia umožňuje skúmať unstained a upevnené - natívne - prípravky tkanivových rezoch.

fluorescenčné techniky

Sú založené na vlastnostiach určitých objektov dať žiar v modrofialové časti spektra alebo UV žiareniu. Mnoho látok, ako sú proteíny, niektorých vitamínov, koenzýmov, drog, vykazujúcich s primárnym (en) luminiscencia. Ostatné objekty začnú žiariť pridaním fluorochrómy - špeciálne farby. Tieto aditíva sú selektívne rozptýlené alebo rozdelené do jednotlivých bunkových štruktúr alebo chemických zlúčenín. Táto vlastnosť bola základom použitie fluorescenčné mikroskopie s histochemické a cytologických štúdií.

oblasti použitia

Použitie odborníci imuno-fluorescenčné detekciu vírusové antigény a ich koncentrácia bola nastavená sú identifikované vírusy Anti orgány a antigény, hormóny, rôzne metabolické produkty, a tak ďalej. V tomto ohľade je diagnóza herpes, mumps, hepatitíde B, chrípky a iných infekcií pomocou fluorescenčných metód výskumu materiálov. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. Mikroskopická imuno-fluorescenčné metóda detekuje nádoru malignity, určiť ischemické oblasti srdca v raných fázach srdcového infarktu a tak ďalej.

používanie ultrafialového

Je založený na schopnosti radu látok v živých bunkách alebo mikroorganizmy sú pevné, ale nefarebné transparentné za viditeľného svetla tkaniny absorbujú UV lúče špecifickej vlnovej dĺžke. To platí najmä pre vysoko molekulárnej zlúčeniny. Tie zahŕňajú proteíny, aromatické kyseliny (methylalaninu, tryptofán, tyrozín, atď.), Nukleových kyselín a purínové bázy piramidinovye a tak ďalej. UV mikroskopie umožňuje určiť umiestnenie a počet týchto zlúčenín. V štúdii týkajúcej sa živých organizmov môžu odborníci sledovať zmeny v ich metabolických procesov.

dodatočne

Infračervené mikroskopia sa používa v štúdii sú nepriehľadné na svetlo a ultrafialové lúče cez absorpciu objektov toku štruktúry, ktorých vlnová dĺžka 750-1200 nm. Ak chcete tento spôsob netreba vopred odhaliť drogy chemickému ošetrenie platiť. Typicky sa spôsob IR je používaný v antropológii, zoológie a iných vied priemyslu. Čo sa týka medicíny, táto metóda sa používa predovšetkým v oftalmológii a Neuromorphology. Štúdia trojrozmerné predmety pomocou stereoskopického mikroskopu. hardvér dizajn umožňuje sledovať pomocou ľavé a pravé oko pod iným uhlom. Nepriehľadné objekty sú skúmané v relatívne malom zväčšení (120 krát nanajvýš). Stereoskopické metódy sa používajú v mikrochirurgii, patomorfologii v súdnom lekárstve.

elektrónová mikroskopia

Používa sa pre štúdium štruktúry buniek a tkanív v makromolekulárnych a subcelulárnu úrovni. Elektrónová mikroskopia nám umožnilo vykonať kvalitatívny skok v oblasti výskumu. Tento spôsob je široko používaný v biochémii, onkológie, virológie, morfológia, imunológia, genetiky a ďalších odboroch. Významné zvýšenie rozlíšenia poskytovanej Prietok zariadenie elektrónov, ktoré prechádzajú elektromagnetického poľa vo vákuu. Ten na oplátku vytvoriť špeciálny šošovky. Elektróny sú schopné prechádzať štruktúry objektu alebo odrazené od nich s odchýlkami od rôznych uhlov. Výsledok je zobrazený na fluorescenčným displeji prístroja. Ak prenos mikroskopia rovinný pohľad získané pri skenovaní, resp obklopujú.

predpoklady

Stojí za zmienku, že pred priepust elektronického mikroskopickým vyšetrením, objekt je vystavený špeciálne školenie. Najmä použitie fyzikálne alebo chemické fixáciu tkanív a organizmov. Sekčné bioptických a, okrem toho, zbaví vody, je vložený do epoxidovej živice, brúsené sklo alebo diamantové nože na ultratenkých sekcií. Potom ich kontrast a študovať. Skenovacie mikroskop skúma povrch predmetov. K tomu, že strieka špeciálnu látku vo vákuovej komore.